Title: Reacción en Cadena de la Polimerasa

Etapa 1. Desnaturalización

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La primera es la desnaturalización de la molécula de ADN, en la cual se separan las dos cadenas mediante el calentamiento de la muestra, a una temperatura de entre 94-96°C, de esta manera cada una de las cadenas queda como molde para la síntesis de las nuevas.

Etapa 2. Alineación

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Una vez separadas las cadenas del ADN se alinean los iniciadores a sitios específicos complementarios de las cadenas sencillas de la región que se va a amplificar. Para que esto suceda, se baja la temperatura entre 40 y 60 °C lo que permite la unión (alineamiento) de los iniciadores.

Etapa 3. Síntesis

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Finalmente se sintetiza una nueva cadena en sentido 5’ a 3’ para lo cual se incrementa la temperatura, por lo general a 72 °C, porque es la temperatura óptima a la cual la ADN polimerasa se une a los iniciadores y comienza la replicación. Estas tres etapas (desnaturalización, alineamiento y extensión del ADN) se repiten sucesivamente, en cada nuevo ciclo.